Витрификация эмбрионов относится к коду 2?

КРИТЕРИИ, ОПРЕДЕЛЯЮЩИЕ КЛИНИЧЕСКУЮ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ВИТРИФИКАЦИИ ЭМБРИОНОВ

Витрификация эмбрионов относится к коду 2?
1 Гайдуков С.Н. 1 Боярский К.Ю. 1 Фолькерт И.Г. 1 Баласанян В.Г. 1 1 ГБОУ ВПО «Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации Замораживание эмбрионов, оставшихся после переноса в цикле овариальной стимуляции, позволяет уменьшить число пересаживаемых эмбрионов и уменьшить процент многоплодной беременности.

В настоящее время наиболее перспективным методом замораживания является витрификация. В статье был проведен анализ клинических параметров, позволяющих получать эмбрионы, подходящие для замораживания на четвертый день. Сравнивались две группы по 100 пациенток с бесплодием в каждой.

В первой группе в результате проведения процедуры ЭКО были эмбрионы, пригодные для замораживания методом витрификации. Во второй группе эмбрионов для замораживания не было. Пациентки в первой группе были моложе, у них наблюдался более высокий уровень АМГ, была меньшая продолжительность бесплодия, и было меньше предыдущих попыток ЭКО.

Также было выяснено, что суммарная частота родов в протоколах с витрификацией эмбрионов на четвертый день в три раза превышает частоту родов в циклах, в которых не было эмбрионов, пригодных для замораживания. витрификация на четвертые сутки развитиякритерии клинической эффективности 1. Боярский К.Ю., Гайдуков С.Н., Чинчаладзе А.С.

Факторы, определяющие овариальный резерв женщины (обзор литературы) // Журнал акушерства и женских болезней. – 2009. – т. 58, № 2. –С. 59–67. 2. Белоус А.М., Грищенко В.И. Криобиология. – Киев: Наукова Думка. – 1994. – 431 c.
3. Trounson A., Mohr L. Human pregnancy following cryopreservation, thawing and transfer of an eight-cell embryo // Nature. – 1983 Oct 20–26. – № 305(5936). – Р.

707–9.
4. Zeilmaker G.H., Alberda A.T., van Gent I., Rijk- mans C.M., Drogendijk A.C.Two pregnancies following transfer of intact frozen-thawed embryos // FertilSteril. – 1984 Aug. – № 42(2). – Р. 293–6.
5. Lornage J., Boulieu D., Mathieu C., Guerin J.F., Pina- tel M.C., James R., Alvarado C. Transfers of frozen-thawed human embryos in cycles stimulated by HMG // HumReprod. – 1990 Jan.

 – № 5(1). – Р. 60–5.
6. Karlström P.O., Bergh T., Forsberg A.S., Sandkvist U., Wikland M. Prognostic factors for the success rate of embryo freezing // HumReprod. – 1997 Jun. – № 12(6). – Р. 1263–6.
7. Mandelbaum J., Belaïsch-Allart J., Junca A.M., An- toine J.M., Plachot M., Alvarez S., Alnot M.O., Salat-Baroux J.

Cryopreservation in human assisted reproduction is now routine for embryos but remains a research procedure for oocytes // HumReprod. – 1998 Jun. – № 13 Suppl 3. – Р. 161–74.
8. AbdelHafez F.F., Desai N., Abou-Setta A.M., Falcone T., Goldfarb J. Slow freezing, vitrification and ultra-rapid freezing of human embryos: a systematic review and meta-analysis // Reprod Biomed Online.

 – 2010 Feb. – № 20(2). – Р. 209–22.
9. Vanderzwalmen P., Bertin G., Debauche Ch., Stan- daert V., van Roosendaal E., Vandervorst M., Bollen N., Zech H., Mukaida T., Takahashi K., Schoysman R. Births after vitrification at morula and blastocyst stages: effect of artificial reduction of the blastocoelic cavity before vitrification // Hum Reprod. – 2002 Mar. – № 17(3). – Р. 744–51.
10.

Cremades N., Sousa M., Silva J., Viana P., Sousa S., Oliveira C., Teixeira da Silva J., Barros A. Experimentalvitrification of human compacted morulae and early blastocysts using fine diameter plastic micropipettes // HumReprod. – 2004 Feb. – № 19(2). – Р. 300–5.
11. Vanderzwalmen P., Ebner T., Zech N.

One decade of experience with vitrification of human embryos in straws, hemi-straws, and high security vitrification straws, In book, Vitrification in Assisted Reproduction, First Edition, 2007, Eds by Tucker. – M., Liebermann J., Informa Healthcare UK Ltd., London. – 320 p.
12. Yokota Y., Yokota H., Yokota M., Sato S., Araki Y..

Birth of healthy twins from in vitro development of human refrozen embryos // FertilSteril. – 2001 Nov. – № 76(5). – Р. 1063–5.

Разработка методик овариальной стимуляции, применяемых при использовании вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), привела к тому, что после переноса одного или двух эмбрионов, в большинстве циклов остаются так называемые «лишние» эмбрионы.

Замораживание этих эмбрионов с целью подсадки их в последующих циклах является важнейшей задачей в современном лечении бесплодия. Этот подход позволяет уменьшить процент многоплодной беременности и увеличить суммарную частоту наступления беременности после проведения процедуры ВРТ. Необходимым условием для того, чтобы в циклах овариальной стимуляции имелись эмбрионы, достойные последующего замораживания, является наличие сохраненного овариального резерва [1].

Первое сообщение об успешной беременности и родах после размораживания и переноса пациентке ранее замороженных эмбрионов относится к 1984 году [3, 4]. Успеху данной процедуры способствовали разработка в 70-х годах ХХ века технологии замораживания и размораживания эмбрионов млекопитающих разных видов [2].

Существуют два подхода к замораживанию человеческих предимплантационных эмбрионов: медленное и быстрое замораживание (витрификация). Методика медленного замораживания эмбрионов была разработана в 80-х годах прошлого столетия и позволила получить первые стабильные клинические результаты. Однако частота наступления беременности при использовании этой методики относительно низкая.

Основной проблемой при медленном замораживании биологических объектов является высокая частота образования кристаллов льда при расширении воды при температуре ниже нуля. Альтернативой медленному замораживанию может служить витрификация биологических объектов.

Теоретической базой для этой процедуры были исследования, которые показали, что при очень быстром замораживании воды образование кристаллов льда не происходит, соответственно, вода не расширяется и находится в состоянии, схожем со стеклом. Такой процесс называется витрификацией.

В настоящее время метод витрификации успешно используется как для замораживания ооцитов, так и для эмбрионов, находящихся на разных стадиях развития. Витрификация эмбрионов на четвертый день развития, что соответствует стадии морулы, относительно редко используется для замораживания эмбрионов, в том числе и методом витрификации.

В 2002 году австрийские исследователи сообщили о 22 циклах, в которых были разморожены эмбрионы, подвергнутые витрификации на стадии морулы. Из 55 эмбрионов 54 пережили размораживание, 30 эмбрионов у 18 пациенток были перенесены в полость матки, из которых у 5 пациенток наступила беременность (27,8 %), во всех случаях закончившаяся родами. Частота имплантации составила 20 % [9].

Португальские исследователи изучали частоту выживания эмбрионов после витрификации на стадии морулы. Выяснилось, что частота выживания составила 73 %, что было сравнимо с выживанием после размораживания эмбрионов на стадии бластоцисты [10].

Также в работе австрийских исследователей было показано, что витрификация человеческих эмбрионов на стадии морул, при использовании более высоких концентраций криопротекторов, таких как этиленгликоль и ДМСО, приводит к более высокой частоте наступления беременности по сравнению с более низкими концентрациями [11].

Также в литературе имеется сообщение о повторной заморозке эмбрионов на стадии морулы [12]. Следует отметить, что витрификация эмбрионов на четвертые сутки имеет ряд важных преимуществ. Во-первых, на этой стадии еще не формируется полость эмбриона (бластоцель) и нет необходимости проведения специальных манипуляций для уменьшения этой полости, и процесс витрификации проходит проще. Во-вторых, есть возможность культивировать размороженные эмбрионы в течение суток до стадии бластоцисты, что позволяет выбирать более качественные эмбрионы для переноса.

Материалы и методы исследования

В исследование были включены данные 100 последовательных циклов ЭКО/ИКСИ, в которых было проведено замораживание оставшихся после переноса эмбрионов и 100 последовательных циклов, в которых таких эмбрионов не было. Также были исследованы исходы переносов размороженных эмбрионов.

Все циклы ЭКО/ИКСИ были проведены в период с мая 2011 года по сентябрь 2012 года в клинике репродукции «Генезис», Санкт-Петербург. Циклы с переносом размороженных эмбрионов были проведены с июля 2011 года по август 2013 года.

Из исследования были исключены пациенты, у которых использовались донорские яйцеклетки или сперматозоиды, а также пациенты, участвующие в программе суррогатного материнства. Овариальная стимуляция осуществлялась по стандартному длинному протоколу с использованием агонистов ЛГ-РГ или по протоколу с антагонистами.

Препараты, содержащие ФСГ, были использованы как рекомбинантного, так и мочевого происхождения. Оплодотворение и культивирование эмбрионов было осуществлено с помощью сред компании «Ориджио», Дания.

Витрификацию эмбрионов осуществляли на четвертые сутки развития с использованием растворов, содержащих следующие криопротекторы: этиленгликоль, фиколл, сахароза, трегалоза (ЗАО «Протеинсинтез», Россия).

После размораживания эмбрионы помещались в те же среды, в которых они культивировались, и перенос в полость матки пациенток осуществлялся через сутки. Во всех случаях было перенесено по два эмбриона. При математической обработке числовых данных был использован t-Стьюдент тест, для дихотомических данных χ-квадрат тест. Уровень статистической значимости был принят Р < 0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

Показаниями для применения процедуры ЭКО/ИКСИ в обеих группах пациенток служили мужской фактор, трубный фактор, эндометриоз, ановуляция, необъяснимое бесплодие, а также сочетание приведенных причин.

В обеих группах распределение причин статистически не различалось, за исключением наличия эндометриоза.

В группе, где были получены эмбрионы годные для замораживания, у 6 пациенток (6 %) был диагностирован эндометриоз, тогда как в группе без замораживания эмбрионов таких пациенток было 23 (23 %), различия между группами статистически достоверные (Р = 0,001).

При анализе клинических параметров пациентов выяснилось, что статистически различались возраст пациенток в обеих исследованных группах, уровень АМГ, продолжительность бесплодия и число предыдущих попыток ЭКО/ИКСИ (табл. 1). В то же время возраст пациентов и показатели спермограммы не различались в обеих группах.

При назначении овариальной стимуляции в обеих группах различалась статистически средняя суммарная доза ФСГ, среднее число полученных яйцеклеток, эмбрионов на третий день развития, а также частота развивающейся беременности после 12 недель в циклах, в которых проводилась овариальная стимуляция (табл. 2).

После того как были завершены переносы эмбрионов в циклах со стимуляцией и оценено количество сообщенных родов, у пациенток с оставшимися эмбрионами и у которых беременность не наступила, в течение последующих двух лет, были проведены протоколы с переносом размороженных эмбрионов. Суммарная частота сообщенных родов в обеих группах показана в табл. 3.

Таблица 1

Клинические характеристики пациентов в обеих группах

Клинический параметрГруппа с замороженными эмбрионамиГруппа без замороженных эмбрионовР
Возраст пациенток, годы32,8 ± 0,436,2 ± 0,5< 0,0001
АМГ, нг/мл3,2 ± 0,31,2 + 0,1< 0,0001
Продолжительность бесплодия, годы5,2 ± 0,37,3 ± 0,4< 0,0001
Число предыдущих попыток0,7 ± 0,11,1 ± 0,20,02

Таблица 2

Показатели овариальной стимуляции и частота наступления беременности в обеих группах

Клинический параметрГруппа с замороженными эмбрионамиГруппа без замороженных эмбрионовР
Суммарная доза ФСГ, мЕд2215 ± 673155 ± 88< 0,0001
Число полученных яйцеклеток12,8 ± 0,66,6 ± 0,5< 0,0001
Число эмбрионов на третий день развития8,1 ± 0,32,9 ± 0,2< 0,0001
Частота развивающейся беременности после 12 недель41 %19 %0,001

Таблица 3

Суммарная частота сообщенных родов в исследованных группах

Суммарная частота родовГруппа с криоконсервацией эмбрионовГруппа без криоконсервации эмбрионовР
Перенос в цикле стимуляции33 %16 %0,008
Первый перенос размороженных эмбрионов43 %
Второй перенос размороженных эмбрионов48 %
Итого48 %16 %0,0001

Наличие эмбрионов, оставшихся после переноса в цикле овариальной стимуляции, является важным критерием прогноза успешных родов при проведении процедуры ВРТ. Пациентки с замороженными эмбрионами были более молодого возраста, у них был выше АМГ, меньшая продолжительность бесплодия и меньше предшествующих попыток ВРТ.

С клинической точки зрения в этой группе реже встречался эндометриоз, и при овариальной стимуляции требовалась меньшая суммарная доза препаратов ФСГ. В то же время число полученных яйцеклеток и эмбрионов было больше. Частота наступления беременности и родов была выше в цикле овариальной стимуляции.

Более того, в группе с замораживанием эмбрионов дальнейшее использования размороженных эмбрионов приводило к увеличению суммарной частоты родов и после двух переносов она достигала 48 %, что в три раза превышало частоту родов у пациенток без замороженных эмбрионов.

Все это говорит о высокой клинической эффективности витрификации эмбрионов на четвертый день развития.

Рецензенты:

Гуркин Ю.А., д.м.н., профессор кафедры детской гинекологии и женской репродуктологии ФП и ДПО, ГБОУ ВПО СПбГПМУ Минздрава России, г. Санкт-Петербург;

Костюшов Е.В., д.м.н., профессор, главный врач ГБУЗ ЛО «Сертоловская городская больница», г. Сертолово.

Работа поступила в редакцию 25.11.2014.

Библиографическая ссылка

Источник: https://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=35991

Витрификация эмбрионов как метод повышения эффективности программ ЭКО у пациенток с высоким риском гиперстимуляции яичников

Витрификация эмбрионов относится к коду 2?
Витрификация – эффективный метод криоконсервации эмбрионов. Показано, что витрификация является оптимальной процедурой для пациенток, проходящих лечение методом ЭКО и находящихся в группе риска развития синдрома гиперстимуляции яичников (СГЯ). 

Данная методика позволяет полностью исключить возможность развития СГЯ тяжелой степени и сохраняет потенциал наступления беременности.

Таблица 1. Характеристика полученных эмбрионов и результаты переноса размороженных витрифицированных эмбрионов пациенткам

В ряде исследований последних лет, касающихся программ экстракорпорального оплодотворения (ЭКО), было показано, что витрификация эмбрионов является одним из методов профилактики риска развития синдрома гиперстимуляции яичников (СГЯ) и средством предотвращения развития СГЯ тяжелой степени.

СГЯ – ятрогенное осложнение, возникающее в результате стимуляции суперовуляции в циклах вспомогательных репродуктивных технологий. Развиваться это осложнение может только после лютеинизации. Таким образом, пусковым механизмом развития и прогрессирования синдрома является эндогенная выработка или экзогенное введение хорионического гонадотропина (ХГ).

При полном проявлении СГЯ наблюдается увеличение яичников в размере с формированием в них множества кист желтых тел, гемоконцентрацией, накоплением жидкости в третьих пространствах в форме асцита, гидроперикарда, гидроторакса и анасарки.

В своей крайней форме синдром может осложняться почечной недостаточностью и олигурией, гиповолемическим шоком, тромбоэмболическими осложнениями.

Выделяют две основные клинические формы СГЯ: раннюю и позднюю, которые отличаются по времени их наступления. Ранний СГЯ коррелирует с ответом яичников на стимуляцию и введением экзогенного ХГ как триггера овуляции, развивается в течение первых 9 дней после трансвагинальной пункции и получения ооцитов.

Ранний СГЯ протекает в виде легкой и среднетяжелой форм, практически не требует стационарного лечения. Поздний СГЯ развивается спустя 10 и более дней после пункции, практически не связан с ответом яичников и коррелирует с эндогенной выработкой ХГ при имплантации эмбриона или при применении ХГ для поддержки лютеиновой фазы.

Несмотря на то что СГЯ тяжелой степени развивается всего в 1–2% случаев [4], этот синдром является основным источником заболеваемости и даже смертности у пациенток, подвергающихся процедурам вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ).

Возникновение и продолжительность синдрома строго связаны с наступлением беременности и числом имплантированных эмбрионов [5].

Поскольку не существует способа быстро вылечить тяжелый СГЯ, основной стратегией ВРТ остается предотвращение риска его развития.

В литературе описано множество способов снижения риска развития СГЯ, но ни один из методов не предотвращает развитие этого синдрома, кроме отмены цикла стимуляции суперовуляции до введения экзогенного ХГ [1, 6, 8, 9, 13, 14].

Отмена цикла является самым эффективным и безопасным методом, но вместе с тем самым разочаровывающим и дорогостоящим для бесплодной пары. Не исключено, что следующая попытка стимуляции может привести к такому же риску развития СГЯ.

Нами был выбран другой подход к сокращению случаев СГЯ – это отмена переноса и криоконсервация эмбрионов в цикле стимуляции суперовуляции.

После проведения криоконсервации эмбрионов их размораживание и перенос производятся, когда уровень гормонов в плазме крови пациентки не повышен (в естественном цикле или на фоне заместительной гормональной терапии).

Хотя у таких пациенток и может проявиться ранний СГЯ, связанный с введением экзогенного ХГ, уровень ХГ, обусловленный наступлением беременности, увеличиваться не будет, что и позволит избежать развития тяжелого СГЯ.

Основным недостатком этого метода является то, что достижение беременности необходимо отложить.

Тактика криоконсервации эмбрионов с отменой переноса эмбрионов в свежем цикле международными экспертами оценивается неоднозначно, что связано с использованием различных методов и способов для криоконсервации эмбрионов [2, 3, 7, 10].

До недавнего времени в большинстве центров ЭКО в мире для криоконсервации эмбрионов на разных стадиях развития использовался обычный метод медленного замораживания. При использовании этого метода показатели выживания эмбрионов и частоты наступления беременности были на низком уровне.

В качестве потенциальной альтернативы обычному методу медленного замораживания для ооцитов, зигот и эмбрионов в последнее время стала применяться процедура витрификации [3, 11, 12, 15], позволившая повысить выживаемость эмбрионов в частности и эффективность лечения бесплодия в целом.

В случаях когда требуется отмена переноса эмбрионов, методика криоконсервации имеет решающее значение для минимизации потерь эмбрионов. В данном исследовании мы показали, что витрификация эмбрионов является оптимальной процедурой для пациенток, проходящих лечение методом ЭКО и находящихся в группе риска развития СГЯ.

В отделении ЭКО Перинатального медицинского центра (Москва) за период с января 2010 г. по март 2011 г. 27 пациенткам была произведена витрификация всех эмбрионов и отмена проведения переноса эмбрионов в цикле стимуляции овуляции в связи с риском развития СГЯ.

Характеристика полученных эмбрионов и результаты переноса размороженных витрифицированных эмбрионов пациенткам, средний возраст которых составил 34,3 ± 0,8 г, представлены в таблице 1. Всего было получено 750 ооцитов, среднее число полученных ооцитов составило 27,8. Криоконсервация эмбрионов производилась в 2 этапа: на 3-и сутки и на 5–6-е сутки развития.

Витрификацию эмбрионов хорошего морфологического качества выполняли с использованием Cryotop-метода. Среднее число витрифицированных эмбрионов составило 6,6.

После размораживания оценивалось качество эмбрионов. Уровень выживаемости эмбрионов 3-х и 5–6-х суток развития был одинаково высоким (100% и 100% соответственно). Перенос размороженных эмбрионов выполнен 23 пациенткам, из них двум выполнен дважды в связи с отсутствием наступления беременности в первом цикле переноса размороженных эмбрионов.

Всего перенесено 48 эмбрионов, среднее число переносимых эмбрионов составило 1,92. Из 25 циклов переноса размороженных эмбрионов клиническая беременность диагностирована в 19 случаях (частота наступления беременности 76%). Частота имплантации составила 58,3%.

Ни у одной пациентки не наблюдалось развития СГЯ тяжелой степени, ни одной из них не понадобилось стационарное лечение.

За время исследования наступление беременности не достигнуто у 4 пациенток, у 3 из них остались витрифицированные эмбрионы, что позволяет, учитывая высокую частоту имплантации, надеяться на достижение беременности с эмбрионами, полученными от одной стимуляции суперовуляции.

Результаты нашей работы показывают, что витрификация эмбрионов уменьшает и даже позволяет полностью исключить возможность развития СГЯ тяжелой степени и сохраняет потенциал наступления беременности. Витрификация – очень эффективный метод криоконсервации эмбрионов.

Он может быть принят в качестве стандартной процедуры для пациентов с риском развития СГЯ.

  • КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: гиперстимуляция яичников, бесплодие, витрификация, эмбрион, беременность, акушерство, гинекология

Источник: https://www.umedp.ru/articles/vitrifikatsiya_embrionov_kak_metod_povysheniya_effektivnosti_programm_eko_u_patsientok_s_vysokim_ris.html

Административное право
Добавить комментарий